Esame Istologico FISH: Protocollo Completo e Perché è Fondamentale nell’Analisi del Tumore

L'esame istologico FISH (Fluorescence In Situ Hybridization) è una tecnica d'elezione per l'analisi dell'amplificazione genica, effettuata su nuclei interfasici a partire da campioni tissutali fissati in formalina e inclusi in paraffina. Questo esame riveste un ruolo cruciale nella caratterizzazione delle cellule tumorali, permettendo la stratificazione prognostica e l'identificazione di target molecolari suscettibili di terapia con farmaci specifici (target therapy).

Il Gene HER-2 e la sua Amplificazione

Il gene HER-2 (Human Epidermal Growth Factor Receptor 2) si trova sul cromosoma 17 in posizione 17q11.2-q12. Tale gene codifica per un recettore cellulare di membrana ad attività tirosinchinasica la cui attivazione induce proliferazione e sopravvivenza cellulare. L’amplificazione di HER-2 è stata identificata nel 20-30% dei tumori della mammella.

Numerosi studi hanno evidenziato l’associazione tra l’amplificazione di questo gene e una peggior prognosi per il paziente. Infatti, i tumori della mammella recanti l’amplificazione di HER-2 si presentano generalmente come forme più aggressive e con un elevato potere metastatizzante. L’identificazione dell’amplificazione del gene HER-2 è di fondamentale importanza per la caratterizzazione molecolare del tumore del quale è affetto il paziente, la definizione della prognosi e per la decisione del corretto piano terapeutico da intraprendere.

Procedura per l'Esecuzione dell'Esame FISH

Lo svolgimento di questo esame richiede il tessuto tumorale del paziente. Per tale motivo è necessario portare al laboratorio il blocchetto di paraffina contenente il tessuto tumorale del paziente, corredato di vetrino colorato tramite Ematossilina ed Eosina e di documentazione clinica.

Modalità di Studio

Le modalità di studio variano a seconda del tipo di tumore e del tipo di alterazione molecolare, e si basano su amplificazione e sequenziamento del DNA tumorale (PCR quantitativa) su ibridazione in situ del DNA tumorale (FISH/SISH) o su colorazioni immunoistochimiche.

Informazioni Utili

Dopo che sono state effettuate le valutazioni anatomopatologica e immunoistochimica, è possibile procedere con l'esame FISH. È consigliabile un preavviso telefonico per ottimizzare i tempi dell’analisi.

Orari di apertura: dalle ore 8:00 alle ore 17:30, e il venerdì dalle ore 8:00 alle ore 15:30.

Refertazione

Il referto definitivo, inviato al medico specialista di riferimento, viene rilasciato con la sollecitudine consentita dai tempi tecnici necessari.

FISH e ALK: Un Approccio Simile nel Tumore al Polmone

La tecnica FISH non si limita all'analisi del gene HER-2 nel tumore della mammella. Ad esempio, nell'80-85% di tutti i tumori al polmone, si ricercano riarrangiamenti del gene ALK. Questi riarrangiamenti danno origine ad una proteina di fusione chiamata EML4/ALK. EML4/ALK conferiscono alle cellule un forte stimolo proliferativo.

L'identificazione di riarrangiamenti del gene ALK è cruciale, perché i pazienti positivi al test possono beneficiare del trattamento con Crizotinib.

In questi casi, la tecnica FISH viene utilizzata per identificare la regione centromerica di ALK.

Interpretazione dei Risultati FISH

L'interpretazione dei risultati FISH richiede l'analisi del numero di copie del gene di interesse rispetto al numero di copie del centromero del cromosoma di riferimento (ad esempio, il centromero del cromosoma 17 (CEP17) nel caso di HER-2). Questo permette di distinguere tra amplificazione genica vera e propria e aumento del numero di copie del gene dovuto a condizioni come la presenza di sovrannumerarie di uno o più cromosomi.

Tabella Riepilogativa

Gene	Tumore	Significato Clinico	Trattamento Target
HER-2	Mammella	Prognosi, risposta a terapia anti-HER2	Trastuzumab, Pertuzumab
ALK	Polmone	Sensibilità a inibitori di ALK	Crizotinib