Spermiogramma: Scopri Come l'Analisi del Liquido Seminale Rivela la Fertilità Maschile!

Lo spermiogramma è l’esame del liquido seminale, cioè la secrezione a cui l’uomo giunge al momento dell’eiaculazione, che si effettua con la raccolta di un campione di sperma. L’esame standard del liquido seminale, detto spermiogramma, è l’esame di base nella valutazione clinica della coppia infertile e rappresenta il punto di partenza per un’eventuale trattamento con tecniche di PMA.

L’analisi del seme con lo spermiogramma si effettua in laboratori che garantiscono gli standard internazionali di affidabilità e sicurezza della raccolta e analisi del liquido seminale, definiti dall’Organizzazione Mondiale della Sanità (2010). Per una corretta esecuzione laboratoristica dell’esame è fondamentale la standardizzazione dell’analisi: da alcuni anni viene considerato come linea guida il manual WHO (WHO laboratory manul for the Examination and processing of human semen, 2010).

Quando e perché viene richiesto questo test?

Il motivo principale per il quale viene prescritto uno spermiogramma è il sospetto di problemi di fertilità nell’uomo. Solitamente, quando il test deve valutare la fertilità maschile, andrebbe eseguito su due campioni di liquido seminale raccolti ad almeno una settimana di distanza l’uno dall’altro.

Prima di iniziare un trattamento di riproduzione assistita, alle coppie verrà chiesto di presentare una serie di esami clinici. Ottenere un campione di seme è un processo semplice, non invasivo e rapido che si rivela necessario per eseguire diversi test diagnostici nell’ambito della PMA.

Fattori che Influenzano l'Analisi

Numerosi fattori, come per esempio la febbre, malattie a trasmissione sessuale, batteriche o virali, l’assunzione di alcuni farmaci o sostanze (alcool, cannabinoidi) avvenuti tre mesi prima dell’esame influenzano l’aspetto del liquido seminale. Questo perchè la maturazione completa di uno spermatozoo avviene in circa tre mesi. Condizioni febbrili di origine virale o batterica, terapie con farmaci, l’assunzione di anabolizzanti per uso “sportivo” e molti altri eventi patologici o terapeutici, possono interferire sulla qualità del campione seminale.

Parametri Valutati nello Spermiogramma

La valutazione della qualità dell’eiaculato prevede l’analisi di diversi parametri, alcuni valutabili macroscopicamente e altri valutabili al microscopio. I parametri che determinano la qualità del seme forniscono informazioni sulla produzione di spermatozoi da parte dei testicoli, sulla pervietà e sulla funzionalità dell’apparato riproduttore maschile, sull’attività delle ghiandole accessorie e sulla capacità di eiaculare.

Benchè l’analisi dello sperma non permetta una distinzione clinica tra pazienti fertili ed infertili, tuttavia, quando diminuisce la qualità del liquido seminale, diminuiscono in senso statistico le probabilità di concepimento.

Esame Macroscopico

L’esame macroscopico prevede l’analisi di cinque parametri: aspetto, fluidificazione, viscosità, volume e pH.

Aspetto: Il liquido seminale presenta visivamente un aspetto opaco e di colore bianco-grigiastro. Un’eventuale trasparenza del campione indica generalmente riduzione della componente nemaspermica, mentre un aspetto di colore giallastro o rossastro indicano, rispettivamente, un’elevata concentrazione di leucociti o emazie spesso entrambi segno di flogosi o infezione delle vie seminali. Un campione seminale lattescente indica la presenza di una forte componente prostatica, tale aspetto è tipico nel caso di ostruzione delle vie genitali.
Fluidificazione: La fluidificazione del liquido seminale segue l’iniziale coagulazione. Se dopo 60 minuti la fluidificazione non è completa, si parla di fluidificazione ritardata, quadro compatibile con disturbi prostatici. La misurazione viene effettuata facendo percolare il liquido lungo le pareti della provetta osservando la qualità del liquido contro una sorgente luminosa. A seguito dell’eiaculazione, il liquido seminale coagula per un breve periodo al fine di permettere il passaggio degli spermatozoi nel muco cervicale. Dai 5 ai 25 minuti dopo, torna a uno stato liquido a seguito dell’intervento degli enzimi prostatici.
Viscosità: La misurazione della viscosità avviene facendo gocciolare il liquido da una pipetta, osservando come le gocce dovrebbero susseguirsi in maniera ritmica una dopo l’altra. Una diminuzione della viscosità può associarsi a scarsa componente cellulare spermatica e non; mentre l’aumento della viscosità visibile con la formazione di filamenti può derivare da uno stato di flogosi o da una patologia prostatica o delle vescichette seminali e può causare difficoltà al movimento degli spermatozoi, tanto da non consentire il raggiungimento del canale cervicale. è considerata normale se le gocce di seme cadono una a una.
Volume: L’analisi del volume permette la valutazione della funzionalità delle ghiandole accessorie e della pervietà delle vie genitali. E’ considerato normale nell’intervallo compreso tra 2 e 5 ml; le alterazioni del volume del liquido seminale possono essere caratterizzate dalla completa assenza di liquido seminale o dalla riduzione o aumento della sua quantità. La condizione di completa assenza di fluido seminale si indica con il termine di “aspermia”; questo fenomeno può essere conseguente ad eiaculazione retrograda o a mancata fase di emissione del liquido seminale in uretra. Con il termine di “ipoposia” si intende la condizione in cui si ha un volume inferiore ai 2 ml; tale alterazione può essere dovuta ad una ridotta astensione dai rapporti sessuali o eiaculazioni, ad una raccoltaseminale incompleta o a flogosi prostato-vescicolari. Infine, nel caso in cui si abbia un aumento di volume (sopra ai 6 ml) si parla di “iperposia” e tale condizione può essere dovuta ad astinenza prolungata o alla presenza di flogosi prostato-vescicolari.
- Volume del liquido seminale: che risulta dall’unione del secreto delle ghiandole dell’apparato genitale maschile. Viene considerato normale quando si attesta tra 1,5 e 5 ml. Nel caso in cui lo spermiogramma evidenzi un volume del liquido seminale inferiore all’1,5 ml si parlerà di ipoposia, che potrebbe indicare una parziale ostruzione dei dotti deferenti o, in alternativa, una limitata risposta simpatica.
- volume, l’ipoposia ovvero un volume inferiore ai valori normali potrebbe indicare che i dotti attraverso i quali si muove il liquido seminale potrebbero essere parzialmente ostruiti.
pH: Il pH seminale è alcalino, con valori di normalità compresi tra 7,2 e 7,8. Valori superiori a 8 indicano generalmente patologie flogistiche mentre, variazioni nel senso opposto, con valori inferiori a 7, possono associarsi a patologie ostruttive dei dotti eiaculatori, a ipotrofie congenite o acquisite delle vescicole seminali. il liquido seminale è per sua natura basico, con un pH oscillante tra 7,5 e 8.

Esame Microscopico

All’esame microscopico vengono valutati: la concentrazione nemaspermatica, la motilità, la morfologia, eventuale presenza di agglutinazioni, la vitalità e la presenza di cellule non spermatiche. Una parte estremamente importante dello spermiogramma è l’analisi microscopica del liquido seminale, necessaria a valutare la concentrazione di spermatozoi, la loro morfologia e mobilità.

Concentrazione Nemaspermica: La determinazione della concentrazione spermatica, espressa in milioni di spermatozoi per millilitro di seme, e il conteggio spermatico totale, espresso in milioni di spermatozoi per eiaculato, sono parametri importanti per valutare gli aspetti quantitativi della spermatogenesi. La determinazione della concentrazione spermatica può essere effettuata mediante l’utilizzo della camera di Neubauer e della camera di conta Makler, che è quella utilizzata nel nostro laboratorio.
- Per effettuare il conteggio si dispone una goccia di liquido seminale sul portaoggetti della camera e lo si copre con il vetrino coprioggetto. Si utilizza un microscopio a contrasto di fase e si determina il numero degli spermatozoi presenti in 10 quadrati del reticolo; questo numero rappresenta la concentrazione degli spermatozoi in milioni per millilitro.
- Oggi la normospermia si ottiene con un numero di spermatozoi > 15×106 ml e un numero di spermatozoi totali > 39×106. Si definiscono le seguenti condizioni patologiche: “oligozospermia” quando il numero degli spermatozoi è < 15×106/ml; “azoospermia” quando si ha totale assenza di spermatozoi nell’eiaculato; “criptozoospermia” per campioni con una concentrazione < 1×106/ml; “polizoospermia” quando il numero degli spermatozoi è >250×106/ml.
- Concentrazione degli spermatozoi: è considerato normale quando è superiore a 20 milioni per millilitro. Nel caso la concentrazione sia inferiore ai 15 milioni per millilitro si parlerà di oligospermia, che verrà ritenuta grave nel caso in cui questo valore scendesse al di sotto dei 5 milioni.
Motilità: Viene valutata entro 1 ora dall’eiaculazione, preferibilmente dopo mezzora dalla raccolta. Si valuta generalmente a fresco, generalmente su un vetrino con coprioggetto da 22×22. Il preparato così ottenuto viene esaminato con ottica in contrasto di fase a 200x o 400x ingrandimenti e si contano 200 spermatozoi intatti (non contare code mobili senza la testa).
- Le classi di motilità sono:
  - PROGRESSIVA (PR) - spermatozoi che si muovono rapidamente sia con moto rettilineo che in grossi cerchi senza tener conto della velocità, ma valutando la loro progressione.
  - NON PROGRESSIVA (NP) - spermatozoi che si muovono senza progressione, movimento in situ.
  - ASSENTE (IM) - spermatozoi immobili.
- Una motilità normale è definita da una percentuale di spermatozoi con motilità progressiva (PR) superiore al 32%. Per valori inferiori si parla di astenozoospermia. Per quanto riguarda la mobilità, i parametri valutati sono diversi. In primo luogo viene osservata la motilità degli spermatozoi, ossia la percentuale di spermatozoi mobili nel campione, che dovrebbe essere pari al 50% a distanza di un’ora dall’eiaculazione.
- Mobilità degli spermatozoi: chiamata anche motilità, identifica la capacità dello spermatozoo di risalire le vie genitali femminili per dare il via alla fecondazione. Lo spermiogramma si concentra in particolare su un numero non inferiore ai duecento spermatozoi caratterizzati da movimento flagellare.
Morfologia: La morfologia è un altro interessante aspetto dello spermiogramma in quanto è uno dei parametri che meglio riflette la maturità e la capacità funzionale degli spermatozoi. Lo spermatozoo maturo è costituito da una parte anteriore ovoidale detta “testa”, seguita da un sottile flagello detto “coda” diviso in un tratto intermedio, principale e finale. Ad unione delle due porzioni vi è una struttura detta “collo”. La testa è principalmente occupata dal nucleo che nella sua parte anteriore presenta una vescicola detta “acrosoma”, la quale contiene gli enzimi necessari alla penetrazione della zona pellucida dell’ovocita.
- Sebbene sia possibile effettuare una prima grossolana valutazione della morfologia, per un’analisi più accurata delle possibili anomalie è necessario compiere una colorazione del campione opportunamente preparato su vetrino. Infine, l’analisi morfologica valuta forma, dimensione e aspetto delle cellule spermatiche. Maggiore è la quantità di spermatozoi anomali, minore sarà la probabilità che questi siano fertili. Si definisce normale uno spermatozoo con testa liscia e ovale, larghezza compresa tra i 2 e i 3 micromillimetri e lunghezza tra i 3 e i 5.
- I difetti che lo spermatozoo può presentare vengono così classificati:
  - difetti della testa: larga, piccola, assottigliata, piriforme, rotonda, amorfa, acrosoma ridotto;
  - difetti del collo e del tratto intermedio: assente, angolato (il collo e la coda formano un angolo di novanta gradi), inserzione asimmetrica del tratto intermedio sulla coda, tratto intermedio spesso o irregolare, tratto intermedio sottile;
  - difetti della coda: corta, multipla, a forcina, rotta, angolata, arrotondata.
- In uno spermiogramma normale ci dovrebbero essere il 4% o più di spermatozoi normali. Se è inferiore a questo valore si chiama Teratozoospermia.
- Morfologia degli spermatozoi: ossia la forma degli spermatozoi, che sono composti da testa, collo e coda.
Zone di Agglutinazioni: Si definiscono agglutinazioni specifiche quelle in cui gli spermatozoi mobili aderiscono tra di loro, testa-testa, coda-coda o in forma mista. La presenza di agglutinazioni non è sufficiente per dedurre una causa immunologica di infertilità, ma è suggestiva della presenza di anticorpi antispermatozoo. Il test utilizzato è il MAR test o Immunobead che risulta patologico quando più del 50% degli spermatozoi presenta particelle adese alla testa, al collo, o alla coda. Riflette il numero di spermatozoi uiti ad altre cellule o particelle.
Vitalità: La vitalità degli spermatozoi è definita dalla percentuale di cellule vive, valutata in laboratorio con un colorazione specifica. La percentuale di spermatozoi vitali viene valutata identificando quelli con membrana cellulare intatta, e cioè si valuta la loro capacità di non accettare sostanze dall’esterno. La valutazione va effettuata preferibilmente entro 30 minuti. La sostanza usata è l’eosina che va mescolata con uguale volume di liquido seminale; si distinguono le forme vive da quelle morte, osservando, in un campo, quanti spermatozoi risultano colorati di rosso (spermatozoi morti) e quanti di bianco (spermatozoi vivi) Le linee guida del WHO ritengono opportuno effettuare la valutazione della vitalità per campioni con meno del 40% di motilità progressiva. La presenza di un’ampia percentuale di spermatozoi vitali ma immobili può essere indicativa di alterazioni strutturali del flagello. La percentuale di spermatozoi vivi deve superare il 58%.

Preparazione all'Esame

Rispettare il periodo di astinenza sessuale permette di paragonare i dati seminali a valori standard di normalità. Inoltre, un’astinenza troppo prolungata provoca accumulo di spermatozoi con possibile riduzione della motilità e alterazione della morfologia, mentre un’astinenza troppo breve o eiaculazioni frequenti nel periodo precedente la raccolta possono causare la riduzione del volume dell’eiaculato e del numero degli spermatozoi.

La raccolta tramite coito interrotto non è una modalità idonea in quanto si può verificare la perdita della prima frazione dell’eiaculato, che di solito contiene la più alta concentrazione di spermatozoi e può comportare una contaminazione del liquido seminale con secrezioni vaginali che possono interferire sulla motilità degli spermatozoi. Essendo il campione molto sensibile a sbalzi di temperatura, è importante una volta compiuta la raccolta evitare escursioni termiche durante il trasporto del campione in laboratorio.

Il campione di seme si ottiene mediante masturbazione, previo accurato lavaggio di mani e genitali, e in un contesto di comfort e serenità emotiva.

Tabella dei Parametri Seminali Standard (WHO, 2010)

PARAMETRI SEMINALI	VALORI DI RIFERIMENTO
Volume seminale	≥ 1.5 ml
pH	≥ 7.2
Concentrazione spermatozoi	≥ 15×106/ml
Numero totale spermatozoi/eiaculato	≥ 39x106
Motilità	≥ 32% motilità progressiva (PR)
Morfologia	≥ 4%
Vitalità	≥ 58%
Leucociti	< 1×106/ml
Immunobead test o MAR test	< 50% spermatozoi con particelle adese

Interpretazione e Azioni Successive

Se i risultati dello spermiogramma rivelano valori al di fuori del normale, è importante consultare un urologo esperto. L’urologo sarà in grado di determinare la causa dei risultati anomali e raccomandare trattamenti o misure correttive appropriate per migliorare la fertilità. Se i risultati dello spermiogramma non sono nella norma, è importante consultare un urologo per una corretta diagnosi e un adeguato piano di trattamento.

L’interpretazione dello spermiogramma richiede una conoscenza approfondita dei valori di riferimento e dei parametri valutati. Un urologo esperto sarà in grado di interpretare correttamente i risultati e fornire informazioni chiave sulla fertilità maschile.

Il concepimento può essere un processo complesso e talvolta, anche quando si cercano attivamente una gravidanza, il risultato tarda ad arrivare. In questi casi, è importante sottoporsi a un’analisi approfondita per identificare eventuali problemi che potrebbero ostacolare la fertilità.