Profilo Oligoclonale Elettroforesi: Scopri il Significato e Come Interpretare i Risultati

L'elettroforesi è una tecnica di laboratorio che sfrutta la massa molecolare e la carica elettrica delle proteine per valutarne quantità e qualità. In particolare, quest'esame consente di separare le proteine in cinque frazioni: albumina, alfa 1 globuline, alfa 2 globuline, beta globuline e gamma globuline. L'alterazione del rapporto tra questi tipi di proteine è indicativa di alcune condizioni patologiche.

Cos'è l'Elettroforesi Proteica?

L’elettroforesi proteica è un’analisi di laboratorio che esamina le proteine contenute nel siero ematico. Queste proteine, chiamate sieroproteine, sono suddivise in frazioni principali: albumina, alfa-1, alfa-2, beta e gamma globuline. Durante l’esame, le proteine vengono separate in base alla loro carica elettrica e dimensione utilizzando una tecnica elettroforetica, che produce un tracciato grafico che permette di individuare eventuali anomalie.

Le proteine sieriche svolgono ruoli essenziali nel corpo, come il trasporto di nutrienti, il supporto del sistema immunitario e la regolazione dei fluidi. Alterazioni nel tracciato elettroforetico possono essere segni di condizioni come infezioni, infiammazioni croniche, malattie del fegato o dei reni, o patologie più gravi come mieloma multiplo. Secondo studi recenti, circa il 10% dei pazienti con mieloma multiplo presenta un tracciato elettroforetico alterato già nelle fasi iniziali della malattia.

Come Funziona l'Elettroforesi?

Chiamata anche elettroforesi proteica o protidogramma, quest'esame è realizzato adottando un metodo molto particolare: al campione è applicato un campo elettrico, grazie al quale le proteine si "raggruppano" per tipologia. Ciascuna delle proteine che permette di analizzare l'elettroforesi, infatti, ha una propria massa molecolare e una carica elettrica, che consente loro di rispondere alla sollecitazione, fornita dalla corrente continua, in un modo caratteristico.

Premessa: in generale, l'elettroforesi è un metodo di separazione basato sulla diversa velocità di migrazione di particelle elettricamente cariche, attraverso una soluzione ed un mezzo di supporto poroso e inerte (come carta, gel di agarosio o foglio di acetato di cellulosa), sotto l'impulso di un campo elettrico. Molte molecole di interesse biologico (aminoacidi, peptidi, proteine, DNA e RNA) possiedono gruppi ionizzabili nella loro struttura, quindi, ad un opportuno valore di pH, queste sono presenti in soluzione come specie elettricamente cariche. Quando sono poste in un ambiente basico, le proteine si comportano da acidi: il gruppo COOH dei vari amminoacidi che costituiscono la struttura della macromolecola, si dissocia in COO- (particella negativa) e H+ (ione positivo).

A cosa serve l’esame di Elettroforesi Proteica?

L’analisi di elettroforesi proteica è utile per rilevare cambiamenti nei livelli e nella distribuzione delle sieroproteine. È particolarmente utile per diagnosticare e monitorare condizioni come infiammazioni, infezioni croniche, malattie autoimmuni e tumori. Può anche aiutare a valutare la funzionalità epatica e la funzionalità renale, evidenziando alterazioni che potrebbero non essere visibili con altre analisi. L’esame è spesso richiesto come parte di un controllo di routine, soprattutto quando si sospettano problemi legati alle proteine sieriche o alterazioni nei livelli di albumina. Grazie al tracciato elettroforetico, i medici possono ottenere un quadro chiaro della salute del paziente.

Quando Richiedere l'Elettroforesi

L’esame elettroforesi delle proteine sieriche è spesso consigliato quando si sospettano condizioni come infezioni croniche, malattie del fegato, problemi renali o disturbi autoimmuni.

Come si effettua l’esame?

L’esame di elettroforesi proteica è molto semplice e non invasivo. Si preleva un campione di sangue, che viene poi analizzato in laboratorio. Le proteine sieriche vengono separate utilizzando un gel o una tecnica capillare, e il risultato è un tracciato grafico che mostra le diverse frazioni proteiche. Questo grafico è essenziale per l’interpretazione dei risultati e per identificare eventuali proteine alterate o livelli fuori norma.

Elettroforesi sieroproteica (esame del sangue): per ottenere il tracciato elettroforetico sul siero è necessario sottoporsi ad un semplice prelievo di sangue dalla vena di un braccio. Prima del prelievo ematico, alcuni laboratori potrebbero richiedere di osservare un digiuno di almeno 10-12 ore.
Elettroforesi delle proteine urinarie (analisi delle urine): è necessario raccogliere una piccola quantità di urine in un apposito contenitore sterile. Quando nelle urine è presente un'alta concentrazione di proteine, invece, il medico può richiedere l'esecuzione dell'elettroforesi delle proteine urinarie.
Elettroforesi delle proteine del liquor: L'elettroforesi delle proteine del liquor può essere prescritta quando si sospetta la diagnosi di sclerosi multipla.

Alcuni medicinali possono influenzare l'esito dell'elettroforesi, pertanto è consigliabile segnalare al medico eventuali terapie in corso. Bisogna sempre ricordare che i valori di riferimento possono cambiare da un laboratorio ad un altro.

Interpretazione del tracciato elettroforetico

L'elettroforesi è un'analisi di laboratorio che fornisce importanti informazioni circa la quantità di proteine presenti nel siero sanguigno o in altri campioni biologici e, per ogni frazione, rivela se siano presenti delle anomalie in termini di qualità. Il risultato dell'elettroforesi permette di esaminare la concentrazione di questi parametri: l'eventuale alterazione del rapporto tra questi gruppi di proteine si osserva durante alcuni stati patologici. Le proteine plasmatiche sono indicatori molto importanti: eventuali alterazioni delle loro concentrazioni possono segnalare la presenza di numerose malattie. In laboratorio, l'elettroforesi è una delle tecniche più utilizzate per analizzare la composizione qualitativa e quantitativa delle proteine.

Elettroforesi delle proteine: cosa si vede nel grafico

Il risultato dell’elettroforesi proteica si presenta sotto forma di un grafico che illustra le diverse frazioni proteiche. La frazione principale è l’albumina, seguita da alfa-1, alfa-2, beta e gamma globuline. Ogni frazione ha un ruolo specifico e un intervallo di valori normali. Alterazioni nel grafico, come picchi o riduzioni in determinate frazioni, possono indicare condizioni patologiche.

Ad esempio, l’albumina rappresenta circa il 60% delle proteine sieriche totali e svolge un ruolo fondamentale nel mantenimento della pressione osmotica e nel trasporto di sostanze. Un aumento delle gamma globuline, ad esempio, può suggerire una risposta immunitaria attiva, mentre una diminuzione dell’albumina potrebbe essere segno di malnutrizione o malattie epatiche.

Componenti Proteiche Principali

L'albumina è la più abbondante proteina nel siero, nonché una delle più importanti dell'organismo. Questa viene sintetizzata dal fegato ed è contenuta soprattutto nei liquidi interstiziali e nel plasma, dove rappresenta, da sola, circa la metà delle proteine circolanti.

Le globuline alfa 1 e 2 svolgono principalmente una funzione di trasporto dei lipidi, dei grassi del sangue e degli ormoni.
Anche le beta globuline trasportano le sostanze presenti nel sangue; tra le più note proteine di questo gruppo vi sono la transferrina (deputata al trasporto del ferro) e la beta-2 microglobulina.

Elettroforesi Proteica alta: cosa significa?

Quando si parla di elettroforesi proteica alta, ci si riferisce a un aumento di una o più frazioni proteiche rispetto ai valori normali. Questo può indicare condizioni come infezioni croniche, infiammazioni sistemiche o malattie autoimmuni. In alcuni casi, un tracciato elettroforetico alterato può essere il primo segnale di patologie gravi come il mieloma multiplo, una forma di tumore che colpisce le plasmacellule.

L’interpretazione del tracciato elettroforetico richiede competenze specialistiche, poiché ogni alterazione deve essere valutata nel contesto clinico del paziente. È per questo che è importante rivolgersi a un laboratorio qualificato per eseguire l’esame.

Quando il tracciato è alterato

Un tracciato elettroforetico alterato può indicare diversi problemi di salute. Ad esempio, un picco nella zona delle gamma globuline può indicare un’infezione o un’infiammazione cronica, mentre un aumento delle beta globuline può essere associato a problemi epatici o renali. In caso di alterazioni significative, il medico può richiedere ulteriori esami per approfondire la diagnosi.

Bande Oligoclonali e Sclerosi Multipla

Nella SM le IgG, cioè un tipo di proteine anticorpali, vengono prodotte in quantità maggiore del normale all’interno del SNC (sintesi intratecale). Questo significa che all’interno del SNC è in atto un processo infiammatorio. Nella SM questi anticorpi sono tutti uguali, perché prodotti dalle stesse cellule, e risultano all’immunoelettroforesi come una o poche bande omogenee e strette (bande oligoclonali). Il reperto delle bande oligoclonali nel liquor è tipico, ma non esclusivo della SM. Si può infatti riscontrare anche nel corso di altre malattie autoimmunitarie, infettive, cerebrovascolari. Al contrario il 5-10% delle persone con SM presenta un liquor normale.

Questo significa che l’esame del liquor di per sé non permette né di confermare né di escludere una diagnosi di SM, ma è importante se valutato insieme al quadro clinico e ai risultati delle altre valutazioni diagnostiche strumentali (i potenziali evocati e la risonanza magnetica).

La tecnica più sensibile per la determinazione qualitativa della bande IgG oligoclonali è l’isoelettrofocalizzazione (IEF), che viene preferenzialmente utilizzata per fare diagnosi di SM: le bande oligoclonali rappresentano infatti l’indice più sensibile di sintesi intratecale di IgG.

I campioni di siero e liquor vengono fatti correre appaiati. La quantità di IgG presenti nel siero e nel liquor caricati deve essere la stessa. I gel per l’isoelettrofocalizzazione contengono anfoliti (composti anfoteri) che creano un gradiente di pH: in questo modo le IgG si separano all’interno del campo elettrico in base al loro punto isoelettrico e non in base al peso molecolare.

Elettroforesi del Liquor

Le proteine del liquor sono indagate con differenti metodi, il loro studio è associato alla diagnosi e alla cura di differenti malattie neurologiche. Alcune proteine del siero sono sostituite nel liquor da altre. Con la strumentazione in tecnica capillare V8 , utilizzando il tampone SPE Buffer , i campioni di liquor hanno tracciati tipici e si osservano le seguenti bande : prealbumina - Albumina - Alfa 1 - Alfa 2 - Beta - Gamma. Molto importante è l’analisi morfologica della zona Gamma delineata quasi esclusivamente dalla IgG.

Infatti c’è una correlazione diretta tra dosaggio immuno-nefelometrico delle IgG Liquorali e il valore espresso delle gamma da frazione delle proteine totali liquorali. Ma l’aspetto più importante ed interessante è che una curva piuttosto piatta e senza alcun cenno di addensamento correla con IEF assenza di bande oligoclonali. Al contrario una curva anche lievemente rilevata e ancor più con asimmetria ed addensamento correla con IEF positivo, cioè presenza di bande oligoclonali liquorali.

L’elettroforesi aiuta l’operatore a meglio osservare l’IEF e la correlazione tra Elettroforesi e IEF raggiunge il 99%. Da rilevare che l’elettroforesi delinea la Componente Monoclonale con picco ben separato, mentre l’IEF lo espone con numerose bande oligoclonali.

Presso il Policlinico Riuniti di Foggia, data l’organizzazione del lavoro, si realizza che il clinico nello stesso giorno in cui invia un Liquor per IEF, riceve nella stessa giornata il calcolo degli indici liquorali e l’elettroforesi, ciò è di rilevante aiuto, egli potrà già formulare una ipotesi diagnostica anche senza il risultato dell’IEF.

Importanza del Monitoraggio delle Sieroproteine

Le sieroproteine sono essenziali per la salute generale del corpo. Alterazioni nei loro livelli possono avere conseguenze significative, influenzando il sistema immunitario, la coagulazione del sangue e la capacità di trasportare nutrienti. Monitorare regolarmente l’elettroforesi delle sieroproteine è fondamentale per prevenire e trattare condizioni potenzialmente gravi.

Nota bene: l'intervallo di riferimento dell'esame può variare leggermente in funzione di età, sesso e strumentazione in uso nel laboratorio analisi. Per questo motivo, è preferibile consultare i range riportati direttamente sul referto.

Normalmente, con l'elettroforesi è riscontrabile una piccola concentrazione di proteine nell'urina. In condizioni normali, la concentrazione delle proteine totali nel liquor è molto bassa.